TG1菌株是一种大肠杆菌菌株,主要来源于E.coliK12。以下是TG1菌株的一些主要特点和用途:
1.生长速度快:TG1菌株是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株之一,在平板上37℃培养7小时即可见克隆。
2.噬菌体展示:TG1菌株是主要的噬菌体展示用菌株,适用于构建抗体或多肽噬菌体展示库。
3.质粒构建和提取:TG1菌株也常用于普通质粒的克隆构建及提取。由于该菌株不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。
4.蓝白斑筛选:TG1菌株中存在lacIqZΔM15基因,使其可以用于蓝白斑筛选等实验。
5.转化效率高:TG1感受态细胞具有高转化效率,经pUC19质粒检测,转化效率可达108109cfu/μgDNA。
6.适用范围广:TG1菌株不仅适用于噬菌体展示,还用于普通克隆、各种文库构建、噬菌体展示蛋白的表达和蓝白斑筛选。
7.保存条件:TG1菌株需在无抗生素的LB培养基中,37℃有氧的条件下培养,然后使用20的甘油保藏菌种。建议保存于20℃或80℃。
综上所述,TG1菌株因其生长速度快、转化效率高、适用范围广等特点,在分子克隆和噬菌体展示实验中得到了广泛应用。
一、TG1.80菌种概述
TG1.80,全称TG1大肠杆菌,是一种经过特殊改造的大肠杆菌菌株。它源自经典的E.coliK-12菌株,经过精心培育和优化,成为目前生长速度最快、应用广泛的克隆用大肠杆菌之一。
二、TG1.80的生长特性
TG1.80在平板上37℃培养7小时即可观察到克隆形成,其生长速度远超其他常见大肠杆菌菌株。这使得TG1.80在实验室操作中能够显著缩短实验周期,提高工作效率。
三、TG1.80的基因型与特点
TG1.80的基因型为[FtraD36proABlacIqZM15]supEthi-1(lac-proAB)(mcrB-hsdSM)5(rKmK)[FtraD36proABlacIqZM15]。该菌株不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,因此在提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。
此外,TG1.80含有lacIqZM15基因,使其可以进行蓝白斑筛选等实验。pUC19质粒检测转化效率可达10cfu/gDNA,转化效率较高。
四、TG1.80的应用领域
TG1.80在实验室中具有广泛的应用,主要包括以下几个方面:
五、TG1.80的保存与使用
TG1.80感受态细胞应保存在-80℃的冰箱中,保质期为6个月。使用时,将100μl感受态细胞置于冰浴中融化,加入目的DNA并混匀,进行热激处理,最后加入适量培养基复苏。复苏后的细胞可用于转化、克隆等实验。
六、TG1.80与其他大肠杆菌菌株的比较
与常见的DH5α、JM109等大肠杆菌菌株相比,TG1.80具有以下优势:
- 生长速度快,缩短实验周期
- 转化效率高,提高实验成功率
- 适用于噬菌体展示、质粒构建、蓝白斑筛选等多种实验
七、
TG1.80作为一种高效、多功能的克隆用大肠杆菌菌株,在实验室中具有广泛的应用。其快速的生长速度、高转化效率以及丰富的应用领域,使其成为科研工作者不可或缺的实验工具。
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